Trang: 74
Tập XXIII, số 10 (146) 2013 Số đặc biệt
Sản xuất và đánh giá cộng hợp IgG kháng nhóm Flavivirus (4G2) gắn chất phát huỳnh quang (FITC) dùng trong phản ứng miễn dịch huỳnh quang trực tiếp định danh nhóm Flavivirus
Production and evaluation of anti Flavivirus (4G2) IgG conjugate-FITC for Flavivirus identification by direct immunofluorescent assay (DFA)
Tác giả: Nguyễn Hoàng Quân, Đào Huy Mạnh, Huỳnh Thị Kim Loan, Vũ Thị Quế Hương
Tóm tắt:
Với quy trình đã được tối ưu hóa, sản phẩm cộng hợp IgG kháng nhóm Flavivirus (4G2) gắn chất phát
huỳnh quang (FITC) sử dụng trong phản ứng miễn dịch huỳnh quang trực tiếp (DFA) định danh nhóm
Flavivirus đã được sản xuất thành công ở viện Pasteur TP.HCM. Nghiên cứu đánh giá sản phẩm cung cấp
các thông số kỹ thuật của sản phẩm bao gồm hiệu giá sử dụng ở đô pha loãng 1/400, ổn định trong vòng
6 tháng. Độ nhạy và độ đặc hiệu của sản phẩm được xác định tương ứng là 98,84% và 88,57% trên 294
mẫu phẩm xét nghiệm. Nghiên cứu này một lần nữa khẳng định tính khả thi, hiệu suất cao và bền vững
trong việc cung cấp chủ động nguồn sinh phẩm chuyên biệt nhằm phục vụ hiệu quả cho hoạt động chẩn
đoán, nghiên cứu, giám sát và phòng chống dịch bệnh.
hóa quy trình và màu hóa dung dịch đệm của bộ sinh phẩm đã được tiến hành nhằm nâng cao tính khả
dụng của bộ sinh phẩm. Dung dịch đệm PBS được màu hóa với đỏ trung tính (R), xanh methylen (M) và
xanh bromophenol (B) trong ba bước: (1) pha loãng huyết thanh, (2) pha loãng kháng nguyên, và (3) pha
loãng cộng hợp. Nghiên cứu giảm thiểu thời gian thực hiện xét nghiệm được tiến hành thông qua việc
thay đổi thời gian ủ kháng nguyên và bỏ qua bước phủ bảng trong quy trình. Mỗi bước cải tiến quy trình
đều được kiểm chứng và đánh giá so sánh với quy trình bộ sinh phẩm của Viện Pasteur TP.HCM. Kết quả
nghiên cứu xác định nồng độ tối ưu của các màu sử dụng trong dung dịch PBS không sữa là R 1/5.103
(w/v), M 1/2.105 (w/v), và B 1/3.105 (w/v). Quy trình được cải tiến (dung dịch đệm màu, không có bước phủ
bảng và ủ kháng nguyên 4 giờ ở 37°C) đã rút ngắn thời gian xét nghiệm 1 ngày cho kết quả tương đồng
so với quy trình hiện tại (95%, Kappa = 0,896)
Summary:
File nội dung:
yhdp_origin74_10_2013.pdf
Tải file: