Trang: 115
Tập XXIII, số 10 (146) 2013 Số đặc biệt
Định lượng nồng độ vi rút Dengue tuýp 1 trên dòng tế bào Vero bằng phương pháp tạo điểm huỳnh quang
Quantitation of Dengue virus serotype 1 on Vero cells by fluorescent focus assay
Tác giả: Trần Thị Ngọc Hà, Đào Huy Mạnh, Hoàng Thị Như Đào, Phạm Thị Thu Hằng,
Huỳnh Phương Thảo, Nguyễn Hoàng Quân, Lê Minh Hiếu, Huỳnh Thị Kim Loan,
Vũ Thị Quế Hương
Tóm tắt:
Bệnh sốt Dengue/sốt xuất huyết Dengue đã và đang bùng phát trên toàn cầu mà trong đó có Việt Nam.
Việc xác định hiệu giá vi rút là cần thiết và cơ bản cho những nghiên cứu và phát triển về sau. Phương
pháp truyền thống thì định lượng nồng độ vi rút sống dựa trên hiệu ứng gây độc tính tế bào của vi rút. Tuy
nhiên, một số chủng vi rút không gây được hiệu ứng này nên chúng tôi đã nghiên cứu định lượng nồng độ
vi rút bằng phương pháp tạo điểm huỳnh quang FFA (fluorescent focus assay). Vi rút Dengue týp 1 được
pha loãng 6 nồng độ từ 10-1 đến 10-6, gây nhiễm trên tế bào Vero và sau đó, tế bào nhiễm sẽ được phát
hiện bằng kháng thể kháng Flavivirus gắn huỳnh quang. Kết quả cho thấy các đốm tế bào nhiễm sẽ xuất
hiện rõ thành từng cụm sau 2 ngày gây nhiễm và có thể đếm được ở nồng độ pha loãng vi rút 10-6, từ đó
tính được nồng độ vi rút trong mẫu ban đầu là 1,05 × 10-8 FFU/ml. Đồng thời, nuôi cấy phân lập trên tế bào
muỗi C6/36 cũng cho kết quả tương tự với nồng độ pha loãng thấp nhất phát hiện được là 10-7. Với ưu
điểm là cho kết quả nhanh, có thể sử dụng nhiều dòng tế bào nhạy cảm khác nhau và không đòi hỏi các
chủng vi rút gây hiệu ứng độc tính tế bào, phương pháp FFA sẽ rất hữu ích cho phòng xét nghiệm nghiên
cứu vi rút học.
Summary:
File nội dung:
yhdp_origin115_10_2013.pdf
Tải file: